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分光光度計的結構組成及光譜范圍

更新時間:2023-01-11      點擊次數:890
  分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。
 
  分光光度計的儀器組成:
 
  分光光度計已經成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
 
  儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。
 
  分光光度計的光譜范圍:
 
  包括波長范圍為400~760 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~400 nm的紫外光區(qū).不同的光源都有其發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
 
  鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
 
  氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源。
 
  如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,即光源發(fā)射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。
 
  不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。
 
  當光線通過某種物質的溶液時透過的光的強度減弱.因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質所吸收只有一部分光可透過溶液。
 
  入射光=反射光+分散光+吸收光+透過光。
 
  如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失則:
 
  入射光=吸收光十透過光
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